Ảnh hưởng của điều kiện nuôi cấy đến sự phát triển của Escherichia Coli

Việc sử dụng E. Coli để sản xuất thuốc là một phương pháp sinh học. Đó là, việc sử dụng công nghệ kỹ thuật sinh học để chuyển Gen ngoại lai vào E. Coli, lên men và nuôi cấy để biểu hiện, ly tâm để thu thập vi khuẩn, sau đó sử dụng một giải pháp cụ thể để phá vỡ vi khuẩn và thu thập chúng. Protein đích được chế tạo thành thuốc sau một số lần chế biến tiếp theo.

1. Nhiệt độ nuôi cấy

Các thí nghiệm cho thấy nhiệt độ nuôi cấy tối ưu nằm trong khoảng 35 ~ 40 ℃ và mật độ tế bào tăng theo sự gia tăng nhiệt độ, phù hợp với đặc tính tăng trưởng chung của E. Coli. Tuy nhiên, tốc độ tăng trưởng nhanh hơn ở 37 ℃ ~ 38 ℃ và tốc độ tăng trưởng tiếp theo tương đối bằng phẳng. Kết hợp các đặc tính nuôi cấy chung của E. Coli và ảnh hưởng chéo của nhiệt độ và các yếu tố ảnh hưởng khác, nhiệt độ nuôi cấy được đặt ở 37.5 ° C trong thí nghiệm.

2. Giá trị pH

Sau khi nuôi cấy E. Coli trong 18h với các giá trị pH khác nhau, kết quả kiểm tra cho thấy giá trị pH 8.0 không ảnh hưởng đáng kể đến mật độ tế bào, và giá trị pH quá thấp hoặc quá cao để đạt được kết quả tốt. Khi giá trị pH là 7.5, mật độ tế bào tương đối cao nhất và od600nm của nó đạt 3.25.

3. ảnh hưởng của oxy hòa tan đến sự phát triển của vi khuẩn

Theo chỉ số oxy hòa tan khác nhau trong máy lên men, mật độ tế bào của hệ thống lên men khi nuôi cấy trong 18 giờ đã thu được. Kết quả thực nghiệm cho thấy mật độ tế bào tăng liên tục với sự gia tăng chỉ số oxy hòa tan, nhưng mật độ tế bào tăng chậm sau 50%.

4. ảnh hưởng của lượng tiêm chủng

Tối ưu hóa lượng tiêm chủng khác nhau có thể ảnh hưởng lớn hơn đến sự phát triển của vi khuẩn. Ở mức 3% đến 4%, trạng thái tăng trưởng của vi khuẩn tốt hơn so với lượng tiêm chủng quá thấp hoặc cao. Lượng tiêm quá thấp sẽ làm cho vi khuẩn phát triển quá chậm. Lượng tiêm chủng quá cao sẽ tiêu thụ một lượng lớn chất dinh dưỡng trong giai đoạn đầu và gây lãng phí các chủng hạt giống, vì vậy lượng tiêm chủng 4% đã được sử dụng trong thí nghiệm.

5. xác định thời gian văn hóa

Kết quả thử nghiệm của thời gian ủ khác nhau cho thấy vi khuẩn tăng gấp bội từ 12 đến 18 giờ, và sau đó phát triển chậm. Nó cho thấy rằng trong giai đoạn sau của sự tăng trưởng theo cấp số nhân, năng lượng của vi khuẩn không phù hợp để sinh sản hàng loạt, nhưng bị ảnh hưởng bởi các chất chuyển hóa. Do đó, để rút ngắn chu kỳ tăng trưởng, việc thu hoạch vi khuẩn nên ở giai đoạn tăng trưởng theo cấp số nhân muộn, nghĩa là 18h.

6. xác định tốc độ

Tốc độ của lồng ấp Lắc tăng lên cùng với sự gia tăng oxy hòa tan và mật độ tế bào tăng tương ứng. Tốc độ tăng trưởng của mật độ tế bào nhanh hơn ở mức 100 ~ 200R/phút và tương đối chậm ở mức 200 ~ 300r/phút, cho thấy tốc độ 200R/PHÚT đã có thể thúc đẩy quá trình hòa tan oxy trong không khí. Có tính đến việc tăng tốc độ có thể tạo ra các tác động bất lợi như bọt, do đó tốc độ tốt nhất được áp dụng trong thử nghiệm là 200R/PHÚT.

* Trên đây là chia sẻ bài viết học thuật. Nếu bạn cần thêm chi tiết, vui lòng nhấp vào tiêu đề.